Từ khóa
peptide synthetase (PS)
cylindrospermopsin
cyanobacteria
PCR
Cách trích dẫn
Tóm tắt
Nghiên cứu sử dụng các cặp mồi đặc hiệu M4 1F/ M5 1R và M13 1F /M14 1R để khuếch đại các đoạn gen liên quan đến sự sinh tổng hợp độc tố CYN (PKS và PS) trong sinh khối vi khuẩn lam sử dụng kỹ thuật PCR nhằm mục đích phát hiện gen liên quan đến sự sinh độc tố cylindrospermopsin trong mẫu sinh khối cũng như sự hiện diện các loài vi khuẩn lam tiềm năng sinh độc tố CYN trong các mẫu nở hoa vi khuẩn lam ngoài tự nhiên. Thí nghiệm được làm với 23 mẫu tại 23 điểm thuộc 9 tỉnh (thành) trong nước. Kết quả cho thấy:
- Các gen PKS và PS trong mẫu tự nhiên có thể được khuếch đại ở điều kiện: nồng độ DNA khuôn mẫu từ 140 ng - 160 ng DNA/ 25 µL thể tích phản ứng; thời gian bắt mồi là 20 giây; và nhiệt độ bắt mồi 55oC.
- Trong số 23 mẫu nghiên cứu, gen PS được phát hiện trong 7 mẫu; gen PKS được phát hiện trong 5 mẫu, trong đó có 5 mẫu thuộc 5 địa điểm phát hiện cả hai gen PS và PKS. So sánh với kết quả phân tích sự hiện diện của loài gây độc Cylindrospermopsis raciborskki và hàm lượng độc tố CYN trong nước cho thấy tiềm năng của việc sử dụng phương pháp PCR trong việc phát hiện các loài tảo độc trong các mẫu tự nhiên.Tài liệu tham khảo
- Ohtani I, Moore RE, Runnegar MTC. Cylindrospermopsin: a potent hepatotoxin from the blue-green alga Cylindrospermopsis raciborskii. Journal of the American Chemical Society. 1992;114(20):7941-2.
- Fastner J, Heinze R, Humpage AR, Mischke U, Eaglesham GK, Chorus I. Cylindrospermopsin occurrence in two German lakes and preliminary assessment of toxicity and toxin production of Cylindrospermopsis raciborskii (Cyanobacteria) isolates. Toxicon. 2003;42(3):313-21.
- Runnegar MT, Kong S-M, Zhong Y-Z, Lu SC. Inhibition of reduced glutathione synthesis by cyanobacterial alkaloid cylindrospermopsin in cultured rat hepatocytes. Biochemical Pharmacology. 1995;49(2):219-25.
- Banker R, Carmeli S, Werman M, Teltsch B, Porat R, Sukenik A. Uracil moiety is required for toxicity of the cyanobacterial hepatotoxin cylindrospermopsin. Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A. 2001;62(4):281-8.
- Li R, Carmichael WW, Brittain S, Eaglesham GK, Shaw GR, Mahakhant A, et al. Isolation and identification of the cyanotoxin cylindrospermopsin and deoxy-cylindrospermopsin from a Thailand strain of Cylindrospermopsis raciborskii (Cyanobacteria). Toxicon. 2001;39(7):973-80.
- Li R, Carmichael WW, Brittain S, Eaglesham GK, Shaw GR, Mahakhant A, et al. Isolation and identification of the cyanotoxin cylindrospermopsin and deoxy-cylindrospermopsin from a Thailand strain of Cylindrospermopsis raciborskii (Cyanobacteria). Toxicon. 2001;39(7):973-80.
- Yilmaz M, Phlips EJ, Tillett D. Improved methods for the isolation of cyanobacterial DNA from environmental samples. Journal of Phycology. 2009;45(2):517-21.
- Bittencourt-Oliveira MDC, Piccin V, Kujbida P, Moura A. Cylindrospermopsin in water supply reservoirs in Brazil determined by Immunochemical and molecular methods. Journal of Water Resource and Protection. 2011;336044:349-55.
- Schembri MA, Neilan BA, Saint CP. Identification of genes implicated in toxin production in the cyanobacterium Cylindrospermopsis raciborskii. Environmental Toxicology. 2001;16(5):413-21.
- Stüken A, Campbell RJ, Quesada A, Sukenik A, Dadheech PK, Wiedner C. Genetic and morphologic characterization of four putative cylindrospermopsin producing species of the cyanobacterial genera Anabaena and Aphanizomenon. Journal of Plankton Research. 2009;31(5):465-80.
- Doyle JJ. A rapid DNA isolation procedure for small quantities of fresh leaf tissue. Phytochem Bull. 1987;19:11-5.
công trình này được cấp phép theo Creative Commons Ghi công-Chia sẻ tương tự 4.0 License International .
Bản quyền (c) 2019 Array